Millised on elektroforeetilise töötlemise standardid?

Millised on elektroforeetilise töötlemise standardid?

Elektroforeesi põhiprintsiip on see, et see viitab laetud osakeste liikumisele elektrivälja toimel. Paljudel olulistel biomolekulidel, nagu aminohapped, peptiidid, valgud, nukleotiidid, nukleiinhapped jne, on ioniseeritavad rühmad, mis võivad kindla pH väärtuse juures kanda positiivseid või negatiivseid laenguid. Elektrivälja toimel liiguvad need laetud molekulid elektroodi suunas, mis on vastupidine nende laengu polaarsusele.

Elektroforeetiline oskus on võime eraldada, määrata või puhastada proove elektrivälja abil, mis põhjustab laetud molekulide erineva kiirusega liikumist, mis tuleneb eraldatavas proovis olevate erinevate molekulide laetud omaduste erinevusest, samuti erinevustest. molekulide endi suuruses, kujus ja muudes omadustes. Elektroforeesiprotsess tuleb läbi viia toetavas keskkonnas. Vaba liidese elektroforees, mille viisid läbi Tiselius et al. 1937. aastal ei olnud fikseeritud tugikeskkonda, seega olid dispersioon ja konvektsioon suhteliselt tugevad, mõjutades eraldusefekti. Seega esitab see elektroforeesi fikseeritud kandekeskkonnaga, kus proov läbib fikseeritud keskkonnas elektroforeesi, vähendades dispersiooni ja konvektsiooni häireid.

Esialgseteks tugikandjateks olid filterpaber ja tselluloosatsetaatmembraan, mida praegu laborites vähem kasutatakse. Pikka aega eraldati ja analüüsiti tavaliselt väikese molekuliga aineid nagu aminohapped, peptiidid, suhkrud jne elektroforeesiga, kasutades söötmena filterpaberit või tselluloosi või silikageeli õhukese kihi plaate. Kuid praegu kasutatakse analüüsimiseks tavaliselt aktiivsemaid meetodeid, nagu HPLC. Need kandjad sobivad väikese molekuliga ainete eraldamiseks lihtsa ja mugava tööga. Korrastatud biomolekulide eraldusefekt on aga suhteliselt halb. Geeli kasutuselevõtt tugikeskkonnana on oluliselt edendanud elektroforeesioskuste arengut, muutes elektroforeesi oskused üheks oluliseks meetodiks bioloogiliste makromolekulide, nagu valgud ja nukleiinhapped, analüüsimisel.

Elektroforeetiline töötlemine ei ole keeruline, kuid me peame ka teadma, et elektroforeetilisel töötlemisel on teatud standardid, vastasel juhul ei tea me, kas kvaliteet on kvalifitseeritud. Millised on siis selle elektroforeetilise töötlemise standardid?

1. Sile pind

See on põhitingimus, kui pind ei ole sile, siis kaob põhikvalifikatsioon;

2. Ühtlane paksus

Elektroforeetiline töötlemine nõuab ühtlase paksuse tagamist, et vältida värvierinevuste ilmnemist;

3. Pinnal pole ilmseid pragusid